ПОИСК МОЛЕКУЛЯРНЫХ ПАРТНЕРОВ АССОЦИИРОВАННОГО С ФОСФАТАЗОЙ ФОСФОПРОТЕИНА (LPAP), УЧАСТВУЮЩИХ В АКТИВАЦИИ ЛИМФОЦИТОВ ЧЕЛОВЕКА
LPAP ‒ небольшой связанный с фосфатазой CD45 трансмембранный белок лимфоцитов, функция которого неизвестна. Изучение интерактома LPAP позволит выявить новые детали регуляции CD45 и активации лимфоцитов в целом. С помощью коиммунопреципитации с последующим масс-спектрометрическим анализом, стабилизации комплексов с помощью поперечных сшивок, а также голубого нативного электрофореза нами проведен поиск белков-партнеров LPAP. В дополнение к фосфатазе CD45, среди партнеров LPAP идентифицированы CD71, CD98, некоторые компоненты цитоскелета, мембранный транспортер аминокислот SLC1A4 и белок HS1, участвующий в передаче внутриклеточного сигнала. Подтверждено, что более 70% молекул LPAP ассоциированы с фосфатазой CD45, с которой LPAP образует комплекс в соотношении 1 : 1. Влияние фосфатазы CD45 на белок LPAP изучено на клетках CEM и Jurkat с нокаутом CD45. Уровень LPAP в этих клетках составлял 10% от уровня в клетках дикого типа. Обнаружено, что фосфорилирование белка LPAP по Ser153 и Ser163 не зависит от наличия CD45, тогда как фосфорилирование Ser99 и Ser172 значительно снижается в отсутствие CD45. Таким образом, белок CD45 способен регулировать экспрессию и статус фосфорилирования LPAP.